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所有色谱峰均展宽的可能原因及解决方法
发布时间:2019-03-18   点击次数:202次

所有色谱峰均展宽的故障小排查,如果实验中碰到先洗脱出来色谱峰展宽时该如何解决呢?下面将为大家介绍所有色谱峰均展宽的可能原因及解决方法。

 

一、样品量过载

稀释样品或减少进样体积使色谱柱恢复平衡。注意:使用强度较弱(相对于流动相而言)的样品溶剂,进样体积可以达到色谱柱死体积的10%左右;而使用强度较强的溶剂,进样体积可能最高仅为柱死体积的1%。

 

二、室温变化过大

需要使用色谱柱恒温箱,以保证色谱柱温度恒定。

 

三、系统没有达到平衡

请保证色谱柱、检测器等有足够的时间平衡。如果是梯度洗脱,两次进样间保证足够的时间使系统重新达到平衡。色谱柱第一次使用离子对试剂时,要有充足体积的流动相和足够的冲洗时间确保色谱柱充分平衡。

 

四、色谱柱问题

若色谱柱问题可能会导致多种谱图异常情况。色谱柱被污染,如果是因为色谱柱被污染导致了问题的出现,则应按照相关方法冲洗色谱柱,如果这样做仍不能使问题得到解决,则需更换色谱柱;色谱柱柱效下降,如怀疑因色谱柱柱效降低导致,则要用一支柱效好的色谱柱更换当前色谱柱,然后用一系列标准样品进行测试,比较保留时间的重复性,如果保留时间是重复的,则表明原来的色谱柱柱效已经下降,需更换色谱柱,如果保留时间不稳定,则问题可能出在流动相混合不均匀、溶剂或保护柱、在线过滤器被污染等;如果系统中使用了保护柱,在测试柱效时应将其卸下,保护柱也可能是污染源,所以在更换色谱柱的时候有必要将保护柱一同更换。

 

五、色谱柱选择不当

检查使用的色谱柱内径和填料是否正确。

 

六、保护柱问题

更换被污染的或者柱效下降的保护柱后再测试色谱柱的柱效,正常情况下柱效应该是上升的。如果不是,应按照前面讨论的方法检查色谱柱是否被污染或柱效是否下降。

 

迅速诊断提示:所有的色谱峰都展宽通常是由于仪器或色谱柱选择不当而造成的。一般要先检查色谱柱和保护柱,因为它们是系统的核心组成部分,需要重点排查。

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